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孙宏瑜

秦皇岛市疾病预防控制中心（秦皇岛市卫生监督所）

 在传染病防控的战场上，快速、精准的病原体检测是阻断传播链、挽救生命的关键。而在众多检测技术中，PCR（聚合酶链式反应）技术凭借其高灵敏度、高特异性和快速检测能力，被誉为病原体检测的“金标准”。今天，我将从疾病预防控制的实际工作出发，带您走进PCR技术的世界，揭开它成为“金标准”的奥秘。

PCR技术：微生物世界的“放大镜”

PCR技术自1985年诞生以来，经历了传统PCR、实时荧光定量PCR（qPCR）、数字PCR（dPCR）三次重大革新，其就像一台生物体外的高精度“复印机”，能在数小时内将极微量的病原体DNA或RNA扩增数百万倍。其核心原理基于DNA的半保留复制，通过高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤的循环，实现目标核酸的指数级扩增。

高温变性：在94℃左右，双链DNA解旋为单链，为引物结合提供模板。

低温退火：降温至55-65℃，特异性引物与模板DNA结合，确保扩增的精准性。

适温延伸：在DNA聚合酶（如Taq酶）的作用下，以dNTP为原料，从引物3'端合成新链。

这一过程循环25—40次后，目标核酸可扩增至数亿倍，即使样本中仅含几个病原体，也能被清晰检测。

PCR技术：病原体的“照妖镜”

1、高灵敏度：捕捉“隐形杀手”

在传染病防控中，早期检测是关键。PCR技术能检测出极微量的病原体核酸，甚至在患者出现症状前即可发现感染。例如：

病毒检测：qPCR技术通过检测病毒RNA，成为某些肺炎确诊的“金标准”，灵敏度比抗原检测高1000倍以上。

HIV残留监测：dPCR技术可检测出每毫升血液中仅1个拷贝的HIV病毒，指导抗反转录病毒治疗方案的调整。

2、高特异性：精准识别“真凶”

PCR技术的特异性源于引物设计。通过比对病原体基因序列，设计出仅与目标核酸结合的引物，避免交叉反应。例如：

多重PCR技术：可同时检测数十种病原体，如某企业开发的单管超多重核酸检测试剂，能一次性鉴别16种呼吸道病原体。

HPV分型检测：通过特异性引物区分高危型（如HPV16、18）和低危型（如HPV6、11），为宫颈癌筛查提供精准依据。

3、快速检测：与时间赛跑

在突发公共卫生事件中，时间就是生命。PCR技术将检测周期从传统培养法的数天缩短至数小时：

沙门氏菌检测：传统方法需3～4天，PCR技术可在1天内完成。

食源性致病菌检测：针对肠毒素大肠杆菌等耐热菌，PCR技术能快速锁定污染源，避免大规模食品召回。

PCR技术在疾控实践中的应用

1、传染病监测：织密防控网络

疾控中心通过PCR技术可构建覆盖呼吸道、消化道、脑膜炎等症候群的病原体监测体系。例如：

呼吸道症候群监测：利用多重实时荧光PCR技术，同时检测流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等，2023年病原查明率达50%以上，位居全市首位。

食源性疾病溯源：通过PCR检测食品中的单核细胞增多性李斯特氏菌、沙门氏菌等，快速定位污染环节，保障食品安全。

2、突发公共卫生事件应急

在流行病期间，PCR实验室成为疾控中心的核心战场。我们24小时轮班，从样本接收、核酸提取到扩增分析，全程严格质控，确保“早发现、早报告、早隔离”。例如：

样本处理：采用磁珠法核酸提取技术，结合UDG酶防污染体系，避免假阳性结果。

通过熔解曲线分析、Ct值计算等手段，确保检测结果的准确性。

PCR技术如同微生物世界的“放大镜”与“照妖镜”，既能放大微小信号，又能精准识别病原体。在疾控工作中，它是我们对抗传染病的“利器”，也是守护公众健康的“防线”。未来，我们将继续深耕PCR技术，为构建更安全、更健康的未来而努力！